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Malme-3M细胞 人皮肤恶性黑色素瘤细胞

发表时间:2024-11-07

细胞:Malme-3M细胞

中文名称:人皮肤恶性黑色素瘤细胞

生长特性:贴壁细胞

培养基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)

冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

Malme-3M细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)

1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)

2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。

3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。

4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。

(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)


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SUMO化修饰与细胞的生物钟

在细胞水平上,它们的生物钟是被精确地控制着。调节性反馈环通过调控一些生物钟蛋白使细胞保持着生理节律。(通派细胞库供应:HM-7细胞)

一个调控生物钟的核心蛋白-BMAL1,似乎是通过SUMO修饰来实现其功能的。 (通派细胞库供应:SW620细胞)

BMAL1和CLOCK分子一同结合称为E-box的调节性DNA序列,来调控参与生物钟机制的基因的表达,如PER1(周期同系物-1;period homologue-1)。(通派细胞库供应:SW527细胞)

BMAL1蛋白当中有好些赖氨酸残基非常保守,不仅在相同的蛋白家族中保守,而且还具有跨种的保守性。电脑模拟分析发现这些残基与用于SUMO化的共有基序非常吻合。(通派细胞库供应:AGS细胞)

发现在COS1细胞中,BMAL1被成功地SUMO化,通过定点诱变发现K259是体内SUMO化的主要位点。 (通派细胞库供应:OS-RC-2细胞)

在肝脏组织中加入SUMO蛋白酶的抑制剂,以稳定SUMO化的蛋白质。研究者检测了SUMO化的BMAL1蛋白,发现该蛋白的量的变化具有周期性。磷酸化的BMAL1与SUMO化的BMAL1同时增加,而且与生物钟基因(如PER1)的诱导保持一致。 (通派细胞库供应:ACHN细胞)