MEF细胞 小鼠胚胎成纤维细胞

细胞：MEF细胞

中文名称：小鼠胚胎成纤维细胞

生长特性：贴壁细胞

培养基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

MEF细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作）

1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）

2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。

3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

SUMO化修饰与细胞的生物钟

尽管已经知道CLOCK是调控BMAL1磷酸化的，它同时还调控着BMAL1的SUMO化过程。但是BMAL1的SUMO化过程究竟有什么生物学功能？（通派细胞库供应：PLC/PRF/5细胞）

与野生型BMAL1相比，突变的BMAL1（K259R）的量并不具有周期性的振荡形式。另外，BMAL1（K259R）的量是野生型的两倍，所以该蛋白的降解似乎有着非常重要的生物学功能。 （通派细胞库供应：RKO细胞）

Bmal1-/-小鼠（Bmal1基因敲除）的胚胎成纤维细胞的E-box控制的基因的振荡形式（Dbp）被改变了。BMAL1的病毒表达载体可以拯救该基因的周期性振荡，（通派细胞库供应：SW480细胞）但是如果是BMAL1(K259R)，则产生了更短的Dbp节律性。

SUMO化在BMAL1的周期性表达和功能中具有重要作用，（通派细胞库供应：SW598细胞）反映出了一个生物钟调节的重要特征。今后的研究应该侧重于识别SUMO通路中的各个元素，因为它们当中有些可能是选择性为生物钟调控服务的。