H522细胞 人肺腺癌细胞
发表时间:2025-01-03细胞:H522细胞
中文名称:人肺腺癌细胞
生长特性:贴壁细胞
培养基:1640 培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。
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利用试管婴儿中被遗弃的胚胎来产生正常的干细胞系,在胚胎发育到5—6天后,就能从中收集到一团特殊的细胞—内细胞团。
然后在培养皿中经过培养,这些内细胞团能发育成胚胎干细胞系,在合适的条件下这些胚胎可以再生成新的干细胞,也可以分化成心脏细胞、肝脏细胞、脑细胞等不同的细胞类型。
在这种干细胞形成的过程中科学家面临的最大问题是,已形成的干细胞系可能发生变异,必须不断合成新的干细胞系。
而克隆干细胞的过程比获取正常胚胎干细胞更加复杂,难度也更大。科学家一般从皮肤细胞等成人细胞中提取DNA,然后将提取的DNA注入事先移去DNA的卵细胞中,于是卵细胞开始像正常胚胎那样分裂,经过一段时间的发育,内细胞团形成,再利用内细胞团培养出干细胞。
已经成功地利用克隆的老鼠胚胎获得干细胞,但在人类实验中并没有获得成功。与自然受精的胚胎不同,克隆胚胎很难存活一个星期即5—6天左右,而只有活这么长时间的胚胎才能形成干细胞所需的内细胞团。
了解克隆过程后,我们就会知道并不是每个卵细胞都能成功地克隆出干细胞,因此存在一个成功率的问题,而科学家们所追求的就是利用最少的卵细胞克隆出最多的干细胞系;