MDA-MB-468细胞 人乳腺腺癌细胞
发表时间:2025-01-14细胞:MDA-MB-468细胞
中文名称:人乳腺腺癌细胞
生长特性:贴壁细胞
培养基:L15+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。
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研究使用了膜支撑的芯片平台。通过固定模式组装金属纳米结构,并置入二氧化硅基质中,从而形成脂质层,而膜芯片由这种脂质层构建而成。
这种金属结构允许胞膜蛋白以一定间距排列在膜上,从而可以在类似芯片平台的膜上实时观察某个蛋白。在此次研究过程中,这一获得支撑的膜使得研究人员可以捕捉每个SOS分子,从而观察其激活的膜相关Ras蛋白的活动,从分子层面对膜环境的Ras活性进行研究。
该研究证实SOS蛋白(Son of Sevenless)激活 Ras信号的机制。活细胞中Ras的激活涉及一些SOS分子,从而使得每个分子的多样化行为得到平均(average)。这一突变被认为是一种随机的“噪点”,研究人员多数认为这是细胞必须克服的一个错误。
此次研究显示,该蛋白随着活性传输信息而在不同状态之间转换动态,这意味着研究人员发现了蛋白信号反应的动态耦合完_全基于动力学,而不是信号被平均(average)的结果。
该研究发现,SOS根据不同活性状态,基于独_特的随机波动动力学来实现其调控作用,而这一现象在集成平均化(enseMBLe averages)的过程中是无法体现的。这一长期波动解释了变构SOS调控和Ras激活的机制。
揭示Ras蛋白信号传导机制中的随机动力学变化有利于找到治疗Ras导致的癌症和其他细胞紊乱疾病的新型高效疗法。实际上,研究人员认为这一机制的揭示对于很多其他胞内信号蛋白的机制的研究也具有启发作用。