C6细胞 大鼠胶质瘤细胞
发表时间:2025-01-12细胞:C6细胞
中文名称:大鼠胶质瘤细胞
生长特性:贴壁细胞
培养基:DMEM-L +10% FBS (GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。
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TGF-β信号在人类多种肿瘤如胃肠道肿瘤、乳癌、卵巢癌和神经内分泌肿瘤的恶性转化、浸润及转移中均扮演重要角色,且能影响肿瘤细胞对化疗的敏感程度。因而,这一信号通路被视作是重要的癌症潜在治疗靶点。
利用全基因组cDNA筛查研究人员确定了核受体NR4A1是TGF-β信号一个强有力的激活因子。NR4A1通过加速AXIN2–RNF12/ARKADIA诱导SMAD7降解促进了TGF-β/SMAD信号。
研究证实,NR4A1与SMAD7和AXIN2相互作用,有力且直接地诱导了AXIN2表达。丧失NR4A1会抑制TGF-β诱导的上皮间质转化和转移,而少量异位表达NR4A1则可以一种TGF-β依赖性方式刺激转移。
研究发现炎性细胞因子可有力地诱导NR4A1表达,在体内外促成TGF-β介导的乳癌细胞迁移、侵袭和转移。值得注意的是,在有高度免疫浸润的乳癌患者中NR4A1表达升高,且NR4A1表达与磷酸化的SMAD2水平呈弱相关,是不良预后的一个指标。
结果表明在乳癌中炎症诱导的NR4A1是促癌TGF-β信号过度激活的一个重要的决定因子。