NCI-H157细胞系人非小细胞肺腺 癌细胞(NCI-H157细胞)

（特别声明：以下细胞均为科研用途细胞 ，仅供科研学术用途，非临床和工业用途。）

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冻存操作步骤：

冻存液成分：10%DMSO + 30%血清+基础培养液

1、取对数生长期细胞，经yi酶消化后，加入适量冻存液， 用吸管吹打制成细胞悬液（1×106 ~ 5 ×106细胞/ml）

2、加入1ml细胞于冻存管中，冷冻管置于4℃ 10 分钟→ -20℃ 30 分钟→ -80℃ 16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽长期储存。

BHK-21细胞株：仓鼠幼仓鼠肾细胞/ 组织来源：血 管/生长特性：贴壁/BHK-21细胞培养条件：DMEM-H +10%FBS

C127细胞株：小鼠乳腺肿 瘤细胞/ 组织来源：乳腺/ 生长特性：贴壁/C127细胞培养条件：1640+10%FBS

C26细胞株：小鼠结 肠 癌细胞/ 组织来源：肠 /生长特性：贴壁/C26细胞培养条件：1640+10%FBS

通派细胞库可提供：

WB（免疫印迹Western Blot）、IHC（免疫组化Immunohistochemistry）、IF（免疫荧光Immunfluorescence）、IP（免疫沉淀Immunoprecipitation）等免疫学检测服务。为科研人员在研究细胞信号通路、生理过程调控、代谢调节等方面提供重要手段。

NCI-H157细胞系人非小细胞肺腺 癌细胞(NCI-H157细胞)

通派细胞库提供各类细胞株1000余株，含各类荧光示踪细胞、耐药株、基因敲除细胞。细胞、动物、分子、蛋白检测平台，SPF级动物房可开展常见动物模型及相关实验。

血清生长测试步骤：

1）： 以a-MEM with 10 % FBS (已测试过) 培养MDCK 细胞于T75 flask 至80% confluency；

2）：以trypsin-EDTA 处理细胞，离心后，加入适量不加血清之a-MEM 制成细胞悬浮液，并测细胞浓度。以不加血清之a-MEM 稀释细胞浓度为1×102活细胞数/ ml。

3）：将1 ml 细胞悬浮液接种入6-well plate 中，并另加入1 ml 含不同浓度的血清(20 % , 10 % , 4 % , 2 % , 1 % , 0.4 %) 的a-MEM，使血清最终浓度为10% , 5 % , 2 % , 1 % , 0.5 % , 0.2 %。用已测试过之血清同时进行对照组试验。

4）：37℃，5% CO2 培养箱培养5-7天，期间不需更换培养基，待细胞群落大到可以肉眼观察，而群落间不互相接触即可。

5）：去除培养基，加入1 ml Carnoy’s 固定液(甲醇:冰醋酸﹦ 3:1)，室温下静置10 min。

6）：去除固定液，水洗二次，加入1 ml 10 % Giemsa solution，，室温下静置染色2-3 min。

7）：去除染液，水洗二次，以肉眼计数群落数；

8）：计算SPE ( Serum Plating Efficiency )：SPE = ( no. of colonies / well ) / 100 x 100 %

9）：计算RPE(Relative Plating Efficiency)：SPE = [ total colonies of six well (test) / Total colonies of six well (control) ] x100 %

NCI-H157细胞系人非小细胞肺腺 癌细胞(NCI-H157细胞)

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细胞培养注意事项：

1）：细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染，即使在细胞培养液中加入了抗J素(一般为预防剂量)，也可能因为操作不慎而引起污染。

（AGS细胞培养条件：90%  F-12、10%胎牛血清 贴壁细胞 人胃腺癌细胞）

2）：常见的有革兰氏阳性菌，如枯草杆菌以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌，其中又以白色葡萄球菌较常见。

（AKR细胞培养条件：90%  高糖DMEM、10% 胎牛血清 贴壁细胞）

3）：培养细胞受细菌污染后，会出现培养液变混浊，pH 改变。也有的培养液肉眼观察无多少改变，只能在镜下发现菌体才知污染。

（alpha TC1 clone 6细胞培养条件：90% DMEM高糖、10% 胎牛血清 贴壁细胞）

4）每天应仔细观察。污染后细胞发生病理改变，细胞内颗粒增多、增粗，变圆脱落死亡，造成试验失败和细胞株(系)丢失。