COS-7细胞 非洲绿猴SV40转化的肾细胞
发表时间:2025-01-04细胞:COS-7细胞
中文名称:非洲绿猴SV40转化的肾细胞
生长特性:贴壁细胞
培养基:1640 培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。
(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)
扩增
为克服干细胞数目少的局限性,研究人员致力于开发干细胞体外扩增技术.然而,要使干细胞在长期扩增中保持未分化状态和多系分化潜能,研究人员尚面临着巨大挑战。
含已知细胞因子和生长因子的无基质无血清体外培养物最终目的是应用于临床,而造血细胞在临床上有广泛应用前景。目前科学家已成功开发体外培养人造血干细胞(HSC)技术以获得大量HSC。
IL-3、干细胞因子(SCF)和Flt-3配体(FL)具有早期效应和细胞系非特异性造血刺激功能, 因而在干细胞扩增中颇受青睐。但目前为止,还没有获得这方面HSC体外扩增的确凿证据。
在加入FL、TPO(thrombopoietin) 、IL-6 和IL-11条件下,脐血HSC得以程度地扩增。PDGF-BB和EGF则使人BMSC程度地扩增。神经元祖细胞已从人皮质培养物中成功分离,并在EGF和FGF-2条件下扩增,200天不到的时间内细胞数增加了150万倍。
过去十年内这些体外干细胞和祖细胞扩增实验的开展归功于重组细胞因子和细胞筛选技术的进展,因此,发现新细胞因子和已有细胞因子的新功能可促进干细胞扩增研究。另外, 系统性分析生长因子受体的表达有助于设计干细胞体外扩增培养的新方法.