NRK-52E细胞 大鼠肾小管上皮细胞
发表时间:2024-12-15细胞:NRK-52E细胞
中文名称:大鼠肾小管上皮细胞
生长特性:贴壁细胞
培养基:1640 培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。
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干细胞培育环境影响干细胞分化
在紫外光照射下,这种凝胶会软化,这使得研究能够改变底物的硬度,且无需分离及转移细胞至新环境。发现细胞在硬底物上培养一天然后恢复至软表面培养后,RUNX2会“失活”从细胞核重定位到细胞质。
(人MDA-MB-435S细胞 来源:通派细胞库 人乳癌细胞)
然而如果细胞在硬底物上培养10天再转换为软底物,之后的10天时间里RUNX2仍在细胞核中活化。当检测YAP激活时看到了相似的结果。在硬底物上度过的时间越长,细胞于软表面培养时YAP活化的时间也相应延长。
(人M14细胞 来源:通派细胞库 人黑色素瘤细胞)
研究结果还具有实用意义。如果一种体外培养过程能够无意中诱导细胞某方面活化……它们有可能不会像研究人员所猜测的那样运转。这无疑增加了我们关于体外应该如何培养干细胞的认识。
(人M4A4细胞 来源:通派细胞库 人乳癌细胞)
RUNX2、YAP以及其他的一些改变与细胞在硬材料上度过的时间相关,但这样的关联未必确定证实了这些改变的原因。