A9细胞 小鼠皮下结缔组织细胞
发表时间:2024-12-09细胞:A9细胞
中文名称:小鼠皮下结缔组织细胞
生长特性:贴壁细胞
培养基:1640 培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。
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电压门控钾离子通道是分布类型最多的一类离子通道,它存在于所有的真核细胞内,主要参与细胞膜静息电位和动作电位复极化过程的调节,决定着动作电位的发放频率和幅度。(人MG63细胞 来源:通派细胞库 人骨肉瘤细胞)
钾通道是大约50个基因编码的α亚单位的聚合物,单个钾通道是同源四聚体,4个亚基对称的围成一个传导离子的中央孔道,恰好让单个钾离子通过。(人143B细胞 来源:通派细胞库 人骨肉瘤细胞)
心脏和内耳中的钠离子通道是由KCNQ1(Q1)编码的α亚基和KCNE1(E1)编码的β亚单位组成。Q1和E1的遗传性突变与心律失常和耳聋有关。(人CNE-1细胞 来源:通派细胞库 人鼻咽癌细胞)
构建一个钾离子通道到底需要多少数量的KCNE1蛋白。理论上是1到14之间的任何一个值。这些通道是由2个E1构建而成。对这个通道构造的了解,是理解威胁生命的心脏疾病(例如心律失常)和治疗这些疾病的药物开发的关键所在。(人SUNE-2细胞 来源:通派细胞库 人鼻咽癌细胞)
一次单一的心跳是心脏肌肉缓慢的扩张和收缩。在某种程度上,心跳可以受心脏细胞表面的一系列通道控制,这些通道能够调控不同离子进出细胞的运动。(小鼠4T1细胞 来源:通派细胞库 小鼠乳癌细胞)
钾离子通道,是由蛋白Q1和E1组成,对于结束每一次心脏收缩是至关重要的。Q1构建钾离子流经的孔道,E1s控制这个孔道如何缓慢的打开和关闭、每个细胞表面有多少通道以及它们如何被药物调控。(猴CV-1细胞 来源:通派细胞库 非洲绿猴肾细胞)
研究小组以超高的检测灵敏度,在哺乳动物活细胞内观察到了E1,计算了单个通道中的蛋白质,而在这个研究领域中这些事情从来没有做过。(猴Cos7细胞 来源:通派细胞库 非洲绿猴SV40转化的肾细胞)
使用三种不同的方法来计算E1,包括用不同的荧光染料标注它们,以及使用一种蝎毒素结合Q1。在每种方法中,都得到了相同的结果。(人THP-1细胞 来源:通派细胞库 人单核细胞白血病细胞)
结果表明,具有高水平E1的细胞中的钾离子通道,E1亚单位不超过2个。具有低水平E1的细胞产生的钾离子通道(2个E1亚单位)和Q1通道(没有E1亚基)——具有1个E1亚基的通道似乎不能形成或被限制不能在细胞表面表达。