WRL-68细胞 人正常肝细胞
发表时间:2024-12-09细胞:WRL-68细胞
中文名称:人正常肝细胞
生长特性:贴壁细胞
培养基:1640 培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。
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调节细胞周期进程(细胞分裂和复制的过程)中的一种蛋白质,实际上激活一个关键的抑癌基因,而不是像以前认为的那样使它失活。(大鼠RIN-m5F细胞 来源:通派细胞库 大鼠胰岛素瘤上皮细胞)
促癌蛋白实际上激活抑癌基因,即一个称为p16-细胞周期蛋白D通路(癌症中最常见的遗传通路突变)促进所有肿瘤细胞的细胞周期进程的一个基本方面。(人BT474细胞 来源:通派细胞库 人乳癌细胞)
细胞周期蛋白D是在细胞复制的第一阶段期间合成的,被认为有助于促进复杂的,多阶段的过程,其中包括与视网膜母细胞瘤(Rb)蛋白的相互作用,Rb蛋白的功能是通过抑制细胞周期进程防止细胞过度生长,直到细胞准备分裂。RB是一个抑癌基因。(人H1975细胞 来源:通派细胞库 人非小细胞肺腺癌细胞)
几个主要的癌症相关的Rb突变和功能失调,以及细胞周期蛋白D一直被描述为促进癌症的一个致癌基因,因为它被认为是通过一种叫做磷酸化的过程,使Rb的抑癌功能失活。(人REH细胞 来源:通派细胞库 人急性非B非T淋巴细胞性白血病细胞)
精心计算细胞周期进程期间的磷酸盐添加到Rb的数量。这多达14个,但发现,细胞周期蛋白D只增加了一个单磷酸,且只有细胞周期进程的早期G1期的14个位点中的一个,基本上有14个不同亚型的Rb。单磷酸盐的作用是激活RB,不使它失活,这个认知已超过了20年。(小鼠OP9细胞 来源:通派细胞库 小鼠颅盖成纤维细胞)
这项研究从根本上改变了对G1期细胞周期调控和许多癌症相关的分子起源的理解。非常重要的是要明白一个基因通路的实际功能和中断它的后果,尤其是细胞周期蛋白D的多种药物抑制剂用于乳癌的临床试验测试这种情况下。